Esistono molti modi per misurare la crescita batterica e un modo è più complicato dell'altro. Sebbene a volte la coerenza della misurazione debba essere ignorata, il modo più semplice è sufficiente per misurare accuratamente la crescita batterica, quindi viene spesso utilizzato. I metodi più comunemente usati sono il monitoraggio e il conteggio dei batteri, la misurazione della massa secca o umida e la misurazione dei livelli di torbidità/torbidità. Il laboratorio della tua scuola dovrebbe avere gli strumenti e le attrezzature necessarie per eseguire almeno uno di questi esperimenti.
Fare un passo
Metodo 1 di 3: monitoraggio dei batteri dal vivo
Passaggio 1. Preparare gli ingredienti
Ci sono molti strumenti speciali che devono essere preparati e potrebbero non essere disponibili in un laboratorio di biologia. Prepara tutte le attrezzature e i contenitori prima di eseguire l'esperimento in modo che non ci siano problemi durante il processo. Dovrai conoscere subito ogni ingrediente utilizzato e i termini di base di questo esperimento.
- Preparare la camera di conteggio. Ha una camera incorporata, un vetro per microscopio e un microscopio, quindi è facile da configurare e utilizzare. Puoi acquistarlo da un laboratorio o da un negozio di forniture scolastiche. Questo strumento dovrebbe avere istruzioni che ti guidano attraverso l'intero processo.
- Preparare una tazza da versare o una tazza da spalmare. Entrambi questi contenitori consentono di monitorare i batteri all'interno.
- Cultura è un termine usato per descrivere la crescita degli organismi in un esperimento.
- Il brodo è un mezzo liquido in cui cresce la coltura.
Passaggio 2. Utilizzare il metodo del piatto di colata o del piatto di diffusione
Puoi anche posizionare i batteri direttamente sul piatto per la visualizzazione utilizzando un microscopio. Versare la coltura su un piattino e posizionarla al microscopio. Monitorare il numero di cellule batteriche presenti.
Passaggio 3. Assicurarsi che la dose di concentrazione sia corretta
Se sono troppi, i batteri si accumuleranno l'uno sull'altro e potresti calcolare male. Diluire la coltura mescolando in altro brodo. Se sono troppo pochi, i risultati del calcolo non saranno accurati. Filtrare il brodo utilizzando un sistema di filtraggio.
Passaggio 4. Contare i batteri
L'ultimo passo è contare i batteri uno per uno. Guarda attraverso la lente di ingrandimento nella camera di conteggio e annota il numero di batteri che vedi. Confronta i risultati con i risultati di altri test.
Metodo 2 di 3: misurazione della massa secca e bagnata
Passaggio 1. Assicurati di avere l'attrezzatura giusta
Questo metodo utilizza attrezzature costose e molto tempo. Se il tuo laboratorio non dispone dell'attrezzatura di cui hai bisogno, è una buona idea utilizzare un altro metodo. Tuttavia, se il tuo laboratorio è sufficientemente attrezzato, ti consigliamo questo metodo in quanto fornisce risultati più coerenti. In questo metodo, avrai bisogno di:
- Forno idraulico a convezione a gravità
- Contenitore di pesatura in alluminio
- Un set di palloni (bottiglie da laboratorio)
- Macchina centrifuga (centrifuga) o sistema di filtrazione da laboratorio
Passaggio 2. Assicurati che la coltura sia nel pallone
Aggiungi la coltura alla zucca. In questa fase, la coltura dovrebbe essere un brodo, anche se in seguito verrà nuovamente separata.
Passaggio 3. Asciugare il contenitore di pesatura in alluminio nel forno da laboratorio
È invece possibile utilizzare una membrana filtrante in acetato di cellulosa con un diametro di 47 mm e una dimensione dei pori di 0,45 µm. Qualunque sia il contenitore di pesatura che usi, pesalo poiché dovrà essere detratto in seguito quando si pesano le cellule batteriche.
Passaggio 4. Mescolare la coltura nel pallone fino a quando non è uniformemente miscelata
La cella affonderà naturalmente a causa della gravità e dovrà essere mescolata per diffondersi uniformemente nel pallone. In questo modo, puoi avere più campioni.
Passaggio 5. Utilizzare una centrifuga per separare le cellule batteriche dal brodo
Questo strumento ruota il pallone e si equilibra rapidamente in modo da drenare il brodo e lasciare la coltura nel pallone.
Passaggio 6. Raschiare la pasta sulla zucca e metterla in un contenitore di pesatura
Butta via il brodo perché non ti serve più. Tuttavia, non eliminare ancora la zucca perché sarà ancora utilizzata.
Passaggio 7. Sciacquare la centrifuga e versare l'acqua di risciacquo nel contenitore
Far cadere l'acqua di risciacquo nel pallone sulle cellule batteriche per ottenere il peso umido.
Passaggio 8. Trova il peso a secco
Per misurare il peso a secco, posizionare il contenitore nel forno e asciugare a 100ºC per 6-24 ore secondo le istruzioni del forno e/o del contenitore di pesata utilizzato. Assicurati che la temperatura non sia troppo alta in modo che i batteri non brucino. Pesare i batteri una volta terminato e non dimenticare di ridurre il risultato del peso del contenitore di pesatura.
Metodo 3 di 3: misurazione della torbidità
Passaggio 1. Preparare l'attrezzatura necessaria
Avrai bisogno di una fonte di luce e di uno spettrofotometro. Entrambi possono essere acquistati presso i negozi di forniture di laboratorio. Lo spettrofotometro dovrebbe avere le istruzioni che ti guideranno nell'uso dello strumento in base al modello che hai. Il prezzo dello spettrofotometro è abbastanza abbordabile e facile da usare tanto che può diventare uno dei metodi più comunemente usati per misurare la crescita batterica.
Passaggio 2. Accendere il campione
Secondo il termine di Layman, la torbidità è il livello di torbidità di un campione. È necessario ottenere il numero di misurazione della torbidità, che viene misurato in NTU (Unità di torbidità nefelometrica). Questo strumento deve essere calibrato prima di poter misurare accuratamente il campione.
Passaggio 3. Registra i risultati
La torbidità è influenzata dal numero di batteri nel campione. Lo spettrofotometro ti dirà anche la percentuale di trasmissione (%T). Questa cifra aumenterà se la torbidità diminuisce. Confronta i risultati con i risultati di altri test per misurare la crescita batterica.
Avvertimento
- Dal momento che hai a che fare con una colonia batterica, prendi precauzioni indossando dispositivi di sicurezza come occhiali e guanti protettivi. È anche una buona idea indossare una maschera, soprattutto se non si conosce il tipo di batteri che si sta studiando.
- Prendere precauzioni prima di maneggiare qualsiasi tipo di batterio, anche il tipo innocuo. Assicurati che tutte le ferite aperte sul tuo corpo siano completamente coperte prima di iniziare.
