Le pipette sono apparecchiature di laboratorio utilizzate per misurare e trasferire volumi molto piccoli di liquidi. L'accuratezza nelle misurazioni delle pipette è molto importante perché le differenze nel volume lasciato cadere dalla pipetta possono influenzare i risultati sperimentali. Per garantire la precisione, è importante controllare la calibrazione della pipetta ogni pochi mesi. Il processo di calibrazione è utile per verificare se questa apparecchiatura gocciola liquido nel giusto volume, in modo da poter effettuare le riparazioni se necessario.
Fare un passo
Parte 1 di 2: controllo della calibrazione
Passaggio 1. Raccogliere i materiali necessari
Per controllare la calibrazione della pipetta, sono necessari una pipetta, puntali per pipette, acqua distillata, bicchiere, termometro, bilancia e bicchiere. La bilancia utilizzata deve essere in scala microgrammi per calibrare la micropipetta con un valore massimo di 1 L.
- Non avrai bisogno di più di 5 ml di acqua. Riempi il bicchiere d'acqua.
- Assicurarsi che la punta della pipetta sia corretta e si adatti perfettamente alla pipetta.
Passaggio 2. Misurare la temperatura dell'acqua distillata
Metti il termometro nell'acqua e lascialo riposare per almeno un minuto. Se la linea rossa del termometro è ancora in movimento, aspetta un altro minuto. Dopo un minuto, registrare la temperatura. Prendi il termometro e asciugalo quando hai finito.
La temperatura dell'acqua è importante da conoscere, perché verrà utilizzata per i calcoli eseguiti per verificare la calibrazione
Passaggio 3. Posizionare il bicchiere sulla bilancia e azzerare la bilancia
Idealmente, la bilancia utilizzata ha una porta e uno spazio isolato all'interno. Collocare il bicchiere nella camera della bilancia e chiudere lo sportello. Se la tua bilancia non ha un cubicolo e una porta, metti semplicemente un bicchiere sulla bilancia. Premere il pulsante "Zero" o "Tara" e attendere che la bilancia mostri zero.
L'azzeramento della bilancia riduce il peso del bicchiere di plastica e permette di pesare solo il peso della sostanza posta nel bicchiere
Passaggio 4. Preparare la pipetta per la calibrazione
Pulire la pipetta con etanolo prima di iniziare e assicurarsi che nulla ostruisca la punta della pipetta. Collegare la punta della pipetta corretta alla punta della pipetta e determinare il volume da testare.
Per la calibrazione, testare i volumi più piccoli e più grandi che possono essere rimossi dalla pipetta
Passaggio 5. Lavare il puntale della pipetta prima di calibrarlo
Premere il pulsante fino al primo limite e immergere la punta della pipetta nell'acqua distillata fino a una profondità di circa 2 mm. Rilasciare il pulsante per assorbire parte del liquido, quindi rilasciare nuovamente il liquido premendo il pulsante. Ripetere questo passaggio tre volte per lavare le punte del contagocce prima dell'uso.
Premere il pulsante fino al secondo limite per rimuovere il liquido rimanente sulla punta della pipetta, quindi estrarre la pipetta dall'acqua
Passaggio 6. Aspirare il volume di calibrazione
Con la punta della pipetta posizionata al di fuori dell'acqua distillata, premere il pulsante fino al primo limite. Immergere la punta della pipetta a 2 mm di profondità nell'acqua distillata e rilasciare il pulsante per aspirare il liquido nella punta della pipetta. Attendere circa 1 secondo prima di rimuovere la punta del contagocce dall'acqua.
Assicurarsi che la punta della pipetta sia completamente sommersa durante il processo di aspirazione. Non ci dovrebbero essere bolle nella punta del contagocce o il risultato potrebbe essere sbagliato
Passaggio 7. Versare il liquido nel piatto di pesatura sulla bilancia
Posizionare il puntale della pipetta sul fondo del bicchiere di pesatura e quindi premere il pulsante della pipetta fino al primo limite. Spostati in un altro punto, un po' lontano dall'acqua, quindi premi il pulsante fino al secondo limite. Tenendo premuto il pulsante, sollevare il puntale della pipetta dal bicchiere di pesatura.
Tieni il puntale attaccato alla pipetta poiché lo utilizzerai di nuovo per altri test di calibrazione
Passaggio 8. Registrare il peso mostrato sulla bilancia
Chiudi la porta della cabina della bilancia se stai usando una bilancia per la porta. Aspetta che i numeri non cambino più. Scrivi nel tuo taccuino.
È importante attendere che i numeri sulla bilancia non cambino di nuovo prima di scriverli. Le note andranno male se non aspetti
Passaggio 9. Ripetere questo processo per eseguire la lettura almeno 10 volte
Azzerare nuovamente la bilancia, lavare i puntali delle pipette prima dell'uso, aspirare lo stesso volume di liquido, rimuovere il volume, quindi registrare il peso. Registra il peso dell'acqua distillata per lo stesso volume, quindi calcola la media di tutte le tue note.
È possibile ripetere questo processo per volumi diversi se ogni volume viene testato più volte
Parte 2 di 2: Calcolo del risultato della calibrazione
Passaggio 1. Definire la formula per il volume calcolato
La formula per calcolare il volume di liquido espulso dalla pipetta è V = w * Z, w è il peso dell'acqua, Z è il fattore di conversione basato sulla densità dell'acqua, mentre V è il volume della quantità di acqua RIMOSSO.
- La variabile Z può essere ottenuta calcolando la densità dell'acqua utilizzando la temperatura registrata all'inizio dell'esperimento.
- Ad esempio: se la temperatura dell'acqua è 23°C, il valore Z è 1,0035 g/mg.
Passaggio 2. Calcolare la media complessiva delle calibrazioni delle pipette
Il volume di acqua rilasciato dalla pipetta è stato pesato almeno dieci volte. Per fare la media di tutti questi valori, sommali tutti insieme e dividi per 10. Se hai eseguito più o meno il processo, somma i risultati complessivi e poi dividi per il numero di prove eseguite.
- Ad esempio: il peso dell'acqua dei 10 esperimenti eseguiti con la pipetta da 10 µl è il seguente: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 e 9, 98.
- La media è: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9.984
Passaggio 3. Inserisci le variabili nell'equazione e risolvi
Una volta determinato il numero corretto per ciascuna variabile, inseriscilo nella formula e completa il volume calcolato. Per risolvere questa equazione, moltiplica semplicemente il peso medio di tutte le prove per il valore Z.
Ad esempio: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10, 019
Passaggio 4. Calcolare la precisione della pipetta
Usa l'equazione A = 100 x Vmedia/V0 per calcolare la precisione della pipetta. A indica la precisione della pipetta, Vmedia è il volume medio calcolato, e V0 è il valore impostato sulla pipetta. Il valore di precisione dovrebbe essere compreso tra 99-101%.
- Se la pipetta è calibrata correttamente, il valore calcolato dovrebbe essere molto vicino al valore effettivo impostato sulla pipetta.
- Ad esempio: A = 100 x Vmedia/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1.0019 = 100,19%
- Questa pipetta è calibrata correttamente.
Passaggio 5. Se necessario, inviare la pipetta per la calibrazione
Se la tua pipetta non supera il test di calibrazione, non utilizzarla per la sperimentazione in questo momento. Le pipette sono apparecchiature di laboratorio molto fragili e costose. Non è possibile correggere la calibrazione da soli, la pipetta deve essere inviata in riparazione. In alternativa, diverse aziende verranno presso il vostro laboratorio e calibrano la pipetta in loco.
